是的，申请人每次申请签证时都必须在线填写DS-160申请表。

当您在线填写DS-160表格时，您需要确保您填写的信息真实无误。提供虚假信息可能会阻止您进入美国。请仔细检查您的答案是否准确，并完整回答每个问题。如果您不知道如何填写英文申请表160，我们将协助您申请该服务。请点击进入中文在线服务，填写DS-160表格。

填写DS-160申请表后，将生成带有字母数字条形码的确认页。美国大使馆和领事馆要求你在面试时带上打印的确认页。打印条码确认页后，请及时预约当面签字时间。请确保您预订表确认页上的条形码与DS-160确认页上的条形码一致。如果条形码不正确，您将无法参加面试。

DS-160表格填写指南： 1. 您预约面试的大使馆/领事馆必须与表DS-160开头选择面试地点的大使馆/领事馆保持一致。重要提示：如果您正在续签合同或不需要面试，请选择“广州”。
2. 所有问题都必须用英语回答，除非您的全名用英语（拼音）填写，并按要求使用中文（表格中的中文标记为“您自己的语言”）。请注意：您必须填写完整的中文姓名和相应的中文电报代码。
3. 填写DS-160表格时，您需要上传过去六个月的照片。有关拍摄和上传高质量照片的详细说明，请访问美国国务院网站。
4. 在填写申请表的过程中，如果非操作持续时间超过20分钟，申请流程将终止。除非已记录应用程序编号或已将应用程序存储在计算机文件中，否则必须重新启动。请记下页面右上角显示的申请编号。如果在提交申请之前需要关闭浏览器，则需要使用申请号继续申请。
5. 完成DS-160表格后，将生成标有字母数字格式的条形码确认页。当你去大使馆或领事馆面试时，带上一封打印清晰的确认信。
6. 打印标有条形码的确认页后，请单击浏览器上的“后退”按钮，然后将DS-160表格的副本发送到您的电子邮件。该文件为PDF格式，需要Adobe Acrobat查看或打印。

以上是关于第二次美国之行。在申请签证时，您是否仍然填写ds160表格？我希望它能帮助你！如果您在申请美国签证过程中有任何问题，请留言给我们，我们将尽快回复您。